正就读中学的少年迈尔斯（沙梅克·摩尔 Shameik Moore 配音）意外被一只遭受放射性污染的蜘蛛咬伤，随后身体发生奇特的变化。偶然机缘，他目睹了蜘蛛侠（克里斯·派恩 Chris Pine 配音）和犯罪头目金并（列维·施瑞博尔 Liev Schreiber 配音）的战斗。为了阻止金并利用时空对撞机扰乱宇宙，蜘蛛侠最终壮烈牺牲。可未过多久，来自平行宇宙的颓废的彼德·帕克（杰克·约翰逊 Jake M. Johnson 配音）出现在迈尔斯面前。为了阻止金并的阴谋，并帮助这个帕克返回自己的宇宙，他们闯入金并的老巢。在这一过程中，二人遭到章鱼博士和徘徊者的狙击。与此同时，来自其他宇宙的女蜘蛛侠、暗影蜘蛛侠、蜘猪侠、二次元蜘蛛妹相继出现。 他们合力与恶势力展开斗争……
演员：迈克尔·比恩 道格·科克尔 瑞克·冈萨雷斯 达米恩·C·哈斯 劳伦·霍尔特 Lindsay LaVanchy Jeff Leach 谢拉米·李 Alessa Luz Martinez 彼得·迈克尔 安德鲁·莫尔加多 路易斯·小泽·张简 布洛克·鲍威尔 菲利斯·索利斯 Britton Watkins Alex Albrecht James Bannon Jeffrey Cannata Jonathan Dixon 梅尔·法尔
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演员：亚伦·格伦尼 柯蒂·斯密特-麦菲 瑞恩·柯万腾 芬恩·利特 德波拉·梅尔曼 Sana #039;a Shaik Matt Testro 达米安·瓦尔谢·霍林 利安娜·瓦尔斯曼 Aidan Gillett Craig McArdle 安迪·麦克菲 Chris Mitchell Checc Musolino Rachael Wegener 娜塔莎·旺加尼恩
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